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细胞培养基有哪些,细胞培养的意义是什么
2017-11-22 09:52:59来源:元素商城

化学词典告诉你细胞培养基有哪些以及细胞培养的意义。细胞培养也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术,还是其中之一的生物克隆技术来说,细胞培养都是一个必不可少的过程,细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。

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细胞培养基的产品

⒈ BME(basal medium eagle)基础伊格培养基

⒉ MEM

⒊ DMEM

⒋ IMDM

⒌ RPMI-1640

⒍ M199

⒎ Mccoy's 5A

⒏ F10\ F12 \DMEM混合F12(三)几种常用细胞培养配套试剂的配置(缓冲液、平衡盐溶液等)

1、无钙、镁、离子溶液(1000ml)

氯化钠(NaCl)8g磷酸二氢钠、(NaH2PO4H20)0.05g、氯化钾(KCl)0.2g、碳酸氢钠(NaHCO3)1g、柠檬酸三钠(Na3C6H5O7,H20)1g、葡萄糖1g、加去离子水或双蒸水至1000mL

2、PBS(Phosphate-Buffered saline)磷酸盐缓冲液

甲液:0.2mol/L磷酸氢二钠溶液、磷酸氢二钠(无水)28.4g、氯化钠8.77g加去离子水或双蒸水至1000mL

乙液:0.2mol/L磷酸二氢钠溶液、磷酸二氢钠(无水)2.4g、氯化钠8.77g加去离子水或双蒸水至1000mL

甲、乙液于4℃保存,使用时按表3-2所示比例,配制成所需pH浓度,高压灭菌后室温保存。

3、Hanks液(HBSSHank‘s Balanced salt solution)

⑴母液甲(20x)配法

①NaCl(A.R)160g、KCl(A.R)8g、MgSO4.7H2O(A.R)2g、MgCl.6H2O(A.R)2g依次溶于800mL双蒸水中,前一物质溶后再加后一种。

②CaCl2(A.R)2.8g溶于100mL双蒸水中,溶时不断搅拌(此液应单配,单溶)。

待上述两溶液中的“溶质”全溶后,将它们混合,再用双蒸水补至1000mL,向其中加2mL氯仿作为防腐剂,置4℃保存。

⑵母液乙(20×)配法

①Na2HPO4.12H2O(A.R)3.04g、KH2PO4(A.R)1.20g、葡萄糖(A.R)20.0g溶于800ml双蒸水中。

②0.4%酚红液0.4g酚红放在玻璃研钵后加0.01N、NaOH11.28mL,直到全部溶解,移入100mL容量瓶中,加水至100mL,过滤,pH为7.4,4℃保存。

待上述各“溶质”完全溶解后,用双蒸水补至1000mL,其中加氯仿2mL作防腐剂,置40℃保存。

3)使用液(1×)配法

取母液甲和母液乙各一份,加双蒸水18份,分装后,塞好瓶塞,挂上标志。以115℃高压灭菌25分钟(以免葡萄糖破坏),置室温后4℃保存,可使用几个月。临用前,用7.5%NaHCO3调至所需pH。

4、Eagle's液(EBSSEagle's Balanced salt solution)

是一种在二氧化碳(CO2)环境中短期维持细胞活性的平衡盐溶液,可用于细胞解离前的清洗、细胞或组织的运输、细胞计数时稀释、溶液的配置等。

5、HEPES液

生物缓冲液,化学性质稳定,在PH7.2~7.6范围内,比NaHCO3缓冲液的缓冲能力更强。

6、NaHCO3缓冲液

常规缓冲体系的一部分,但是不稳定,易受空气中CO2的含量而改变PH值,影响缓冲效果。

细胞培养的意义

⒈可以进行植物体外受精及植物胚胎发育过程研究。

⒉可以进行植物生长发育有关的重要基因或影响因素的研究。

⒊可以方便地通过实验手段培育植物新品种。

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