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什么是酶标板,酶标板究竟有多少种类
2019-05-22 09:29:05来源:元素商城

酶标板(ELISA PLATE)在酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)中,参与免疫学反应的抗原、抗体、标记抗体或抗原的纯度、浓度和比例;缓冲液种类、浓度和离子强度、pH值和反应温度、时间等条件起着关键作用。

 酶标板.jpg

根据不同的分类标准,酶标板有着不同的分类。

一、根据孔数,可分为96孔、48孔,其中96孔是现在最常用的,因为酶标板就是配合酶标仪用,现在的酶标仪做出来的最多的是96孔,所以客户在购买时也是要96孔板,厂家也为了适应市场基本上做出来的就是96孔的。

 

二、根据其底部的不同,又分为平底的,U型底、V型底。平底的折射率低,适于在酶标仪检测;U型底的酶标板折射率较高,方便加样、吸样、混匀等操作,可以不用放在酶标仪上,直接通过目测观察颜色变化情况,从而判定有无相应的免疫反应。V底的酶标板可以精确的吸取样品。

 

三、根据酶标板与蛋白和其它分子结合能力的不同,又分为高结合力,中结合力和氨基化的。

1)高结合力

此种酶标板,表面经处理后,其蛋白结合能力大大增强,可达300~400ng IgG/cm2,主要结合的蛋白分子量>10kD。使用该类酶标板可提高敏感性,并可相对减少包被蛋白的浓度和用量,不足之处为较易产生非特异性反应。抗原或抗体包被后,以非离子去污剂无法有效地封闭未结合蛋白的部位,需使用蛋白作为封闭剂。

 

2) 中结合力

此类酶标板经表面疏水键被动与蛋白结合,适合作为分子量>20kD的大分子蛋白的固相载体,其蛋白结合能力为200~300ng IgG/cm2。由于该类酶标板所具有的仅与大分子结合的特性,适用于作为未纯化抗体或抗原的固相载体,可降低潜在的非特异性交叉反应。该类板可以惰性蛋白或非离子去污剂作为封闭液。

 

3)氨基化

这种酶标板经表面改性处理后拥有带正电荷的氨基,其疏水键由亲水键取代。该类酶标板适合作为小分子蛋白的固相载体。使用合适的缓冲液和pH值,其表面可通过离子键与带负电荷的小分子结合。由于其表面的亲水特性和可通过其它交联剂共价结合的能力,可用于固定溶于Triton-100Tween 20等去污剂的蛋白分子。该类板的缺陷为由于降低了疏水性,一部分蛋白分子无法结合;此外,其表面需有效地封闭。由于亲水和共价的表面特性,使用的封闭液必须能够与非反应性氨基基团和所选择的交联剂中任何功能基团发生作用。


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