化工资讯
当前位置:元素商城  >  化工资讯网  >   化工热点资讯   >   关于细胞培养,你需要知道这些知识
关于细胞培养,你需要知道这些知识
2019-07-22 16:21:05来源:元素商城

细胞培养,简单地说就是把来自机体的组织分散成为单个细胞,置于模拟体内条件的外部环境中生存,使其不断生长、繁殖或传代,借以观察细胞的生长、繁殖、衰老等生命现象。随着生命科学研究的不断深入,细胞培养技术在整个生命技术产业发展中占据了关键地位。下面就细胞培养过程中可能会遇到的问题罗列出来,跟大家探讨下。

 细胞培养.jpg

1. 如何选用细胞培养基?

答:细胞培养基是人工模拟细胞在体内生长的营养环境,是提供细胞营养和促进细胞生长增殖的物质基础。培养基中常常添加血清、抗生素等成分。培养基主要包括天然细胞培养基、合成细胞培养基和无血清细胞培养基等。由于细胞种类和培养条件不同,细胞培养基的选择也不同,在动物细胞培养中最常用的培养基是合成细胞培养基,如BMEMEMDMEMHAM F12PRMI1640等。由于天然培养基的一些营养成分不能被合成细胞培养基完全代替,因此一般需要在合成细胞培养基中添加5%~10%的血清。每一细胞株均有其特定使用且已适应的细胞培养基,一般在开始进行细胞培养之前,上ATCC、中国科学院细胞库或者其他细胞库查清楚每一株细胞的培养条件是很有必要的,若骤然使用和原先提供的培养条件不同的培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活。

 

2、何时须更换培养基?

答:视细胞生长密度而定, 或遵照细胞株基本数据上之更换时间,按时更换培养基即可。

 

3、培养基中是否须添加抗生素?

答:除于特殊筛选系统中外,一般正常培养状态下,培养基中不应添加任何抗生素。

 

4、细胞培养中使用抗生素的注意事项

答:细胞培养时不应长期使用抗生素,因为连续使用抗生素会促进抗生素耐药性细胞株的产生,导致轻度污染持续存在。抗生素只能作为对付污染的最后手段短期使用,并尽快撤除。如果长期使用抗生素,则应同时进行无抗生素培养,以便作为鉴别隐性感染的对照。

 

5、细胞培养温度的设定

答:细胞培养的最佳温度主要取决于细胞供体的体温,此外也受到解刨部位体温差异的影响,例如:皮肤温度低于骨骼肌的温度。与温度过低相比,细胞培养时温度过高是更为严重的问题;因此,往往将培养箱的温度设定为略低于最佳温度。

 

6、各类细胞培养的最佳温度

答:大多数人和哺乳动物细胞系在36~37℃下具有最佳生长状态。

 

昆虫细胞在27℃具有最佳生长状态;在低于27℃以及2730℃范围内,细胞生长较慢。

 

温度超过30℃时,昆虫细胞活力降低,即使温度降至27℃,细胞活力也无法恢复。

 

禽类细胞系在38.5℃时具有最佳生长状态。虽然此类细胞也可在37℃下培养,但其生长速度会变慢。

 

来源于冷血动物(例如:两栖动物、冷水鱼)的细胞系可耐受很宽的温度范围,为15-26℃。

 

请注意每种细胞的培养条件均有所不同,偏离某种细胞所需的培养条件会导致细胞表型异常,甚至培养完全失败。

 

因此,我们建议您应熟悉自己使用的细胞系,实验中严格遵守所有产品附带的操作说明。

 

7、为什么培养细胞要添加血清?

答:培养细胞用的培养基为人工合成,但动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚,加入动物血清是为了给体外培养的细胞提供一个类似生物体内的环境,此外动物血清中也包含了一些动物的激素和酶,可以促进细胞的发育。主要作用有:

 

(1) 提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等,是细胞生长必须的物质。

 

(2) 提供激素和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质激素(氢化可的松、地塞米松)、类固醇激素(雌二醇、睾酮、孕酮)等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。

 

(3) 提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要的低分子量物质,如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等,转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。

 

(4) 提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤,对培养中的细胞起到某些保护作用。

 

细胞培养中血清的保存

答:细胞培养中所用的血清不尽相同,您需要根据您所培养的细胞种类和培养要求来挑选出最适合的血清。

 

我们建议将血清保存在-10-20℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。

 

若您无法一次用完一瓶,建议您将血清无菌分装至合适体积的灭菌容器内,再放回冷冻箱保存。

 

解冻血清时,建议您将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰箱过夜融解,然后在室温下使之全融。需要注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。

您可能感兴趣的中国化工网栏目: 化学试剂化学元素化学元素周期表CAS查询
元素商城微信公众号
「一个有逼格的公众号」
相关标签: 原料化工中间体  
相关专题: 化学试剂
相关阅读:
●  常见的光学仪器有哪些?
说到光学仪器,你脑海中会想到什么?相信绝大多数的小伙伴首先想到的就是照相机或者显微镜。光学仪器有多种,按照种类可以分为两大类,一类是成实像的光学仪器,如幻灯机、照相机等;另一类是成虚像的光学仪器,如望远镜、显微镜、放大镜等。 什么是光学仪器光学仪器是由单个或多个光学器件组合构成,是能够产生光波并显示图像,或接收光波并分析、确定其若光性质的一类仪器。它是仪器仪表行业中非常重要的组成类别,可......
●  格氏试剂的制备以及应用
格氏试剂属于重要的有机合成试剂,是含卤化镁的有机金属化合物,由于含有碳负离子,因此属于亲核试剂,由法国化学家维克多·格林尼亚发现。由有机卤素化合物(卤代烷、活泼卤代芳烃)与金属镁在绝对无水乙醚中反应形成有机镁试剂,称为“格林尼亚试剂”,简称“格氏试剂”。 格氏试剂的发现1912年,诺贝尔化学奖授予法国化学家维克多·格林尼亚。他发现了金属镁与许多卤代烃的醚溶液反应,生成了一类有机合成的中间......
●  没想到一次性口罩居然有这么多用处
一次性口罩在我们的日常生活中属于比较常见的生活用品,随着城市工业化的发展,空气污染变得越来越严重,外出时佩戴一次性口罩还是非常必要的。一次性口罩出了可以用来抵挡空气污染之外,还可以用来做什么呢?下面就来简单看看有哪些生活小妙招吧! 一、制作香囊我们将一次性口罩剪开,然后将生姜从开口处放进去,再往生姜上面倒入一些花露水,并且用一次性口罩拆下来的白色股条将口罩的开口地方扎起来即可。一个简单的......

您确定要从购物车中移除吗???