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高效液相色谱法检测药品中的DTT和DTTox
2020-09-17 17:07:54来源:元素商城

高效液相色谱法(HPLC)又称“高压液相色谱”、“近代柱色谱”等是色谱法的一个重要分支,具有高压、高速、高灵敏度以及适用范围广泛的特点,已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术应用

近年来,高效液相色谱法在药品成分、保健食品功效成分、营养强化剂、维生素类、蛋白质的分离测定等应用广泛。罗宁等采用高效液相色谱法同时对药品中的DTT和DTTox进行检测。

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DTT,二硫苏糖醇是一种小分子有机还原剂DTT的用途之一是作为巯基化DNA的还原剂和去保护剂。在DNA提取实验中常常添加DTT用来打断蛋白质之间的二硫键,使DNA充分游离,提高DNA的提取效率 。DTT也常常被用于蛋白质中二硫键的还原,可用于阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形成的蛋白质分子内或分子间二硫键DTToxDTT的氧化态,是一种包含二硫键的六元环状结构,具有较高的还原性。

二硫苏糖醇(DTT)还用于主要用于临床和实验领域,在有些药品的生产过程中加入DTT可以保护目标蛋白结构,以维持药物活性。但是DTT的还原性较强,在体内可能会破坏蛋白质结构,从而引起酶失活等现象,而DTTox会使肌酸激酶结构发生变化,达到一定浓度时甚至会使肌酸激酶完全失活。因此有必要对药品中的DTT和DTTox进行检测。

目前有报道用二硫苏糖醇分光光度计测定钴离子含量,但DTT极容易被氧化,且滴定法灵敏度不高,所以不能采用钴离子来反滴定DTT。DTTox也没有有效检测方法。使用高效液相色谱法对药品中的DTT和DTTox进行检测,具有操作简便、分离度好、灵敏度高、重复性好、回收率高等优点,是一种有效的检测方法。

相关链接:二硫苏糖醇(DTT)

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